闪式提取器白及须根多糖提取的方法
1:多糖标准曲线的绘制,先称取葡萄糖标准品0.0100g,去离子水定容至100ml,在取1.0/2.0/3.0/4.0/5.0ml定容至10ML,得到不同浓度葡萄糖标准溶液。分别取1ml加入试管中,在加入1ml5%笨酚溶液,充分混匀后,迅速加入5ml浓硫酸,沸水浴10min后,冷却至室温。
2:白及须根多糖的提取及提取量测定,将白及须根粉碎后过40目筛,称取一定量白及须根粉末,用石油醚加热回流脱脂2次,挥干溶剂。精密称取脱脂后的白及须根粉末10g. 加入一定比例去离子水作为提取溶剂,在一定电压、超声 功率和温度下提取一定时间,提取 液 千 4000 r · min 一 1 离 心 10 min, 沉淀按上述方法再提取一次,合并滤液后采用 Sevag 法[ 14 ] 除 去 蛋 白 ,得 到 脱 蛋 白 的 多 糖 溶液 ,再经 减 压 浓 缩 至 一 定 体 积 ,冷却 至 室 温 ,加 入 5 倍量无 水 乙 醇 ,置千 4 屯 冰箱 中静 置 过 夜 ,次 日 于4000 r · min一1 离 心 10 min, 离心后将沉淀冷冻干燥得白及须根多糖,用去离子水复溶并定容至一定体积.
3:协同提取时间对臼及须根多糖提取量的影响 精密称定脱脂 后 的白及 须 根 粉末 10 .00 g, 按照1 : 30 料液比加 入去 离 子水 作 为 提取溶 剂 ,在 闪 提 电压 为 220 V、超声 功率为 10 0 W、提取 温度为 60 "C 的条 件 下 分 别 提 取 20 、40 、60 、80 、10 0 、120 s, 离心后过滤,二次 提 取 后 按 照 1.2.2 项 条 件 下 制 备 粗 多 糖 ,考察协同提取时间对多糖提取量的影响。
4:料液比对白及须根多糖提取量的影响 精密称定脱脂后的白及须根粉末 10.00 g, 分别按照料液比为1: 10、1: 15、1: 20、1: 25、1: 30、1: 35 g/ mL 加入去离子水作为提取溶剂 ,在闪 提 电 压 为 220 V 、超声功 率 为 10 0 W提 取温度为 60 "C 的 条 件 下 提 取 60 s, 离 心 后 过 滤 ,二次 提 取 后 按 照 1. 2.2 项 条 件 下 制 备 粗多糖,考察料液比对多糖提取量的影响。
5:闪提电压对白及须根多糖提取量的影 响 精密称定脱脂后的白及须根粉末10.00 g, 按照1: 20 料液比加入去离子水作为提取溶剂,在超 声 功率 为 10 0 W 、提 取 温 度 为 60 飞 闪 提 电 压 分 别 为120 、140 、160 、180 、200 、220 V 的 条 件 下 提 取 60 s, 离心 后 过 滤 ,二次 提 取 后 按 照 1. 2.2 项 条 件 下 制 备 粗 多糖,考察料液比对多糖提取虽的影响。